Um candidato a transportador permitindo que dinoflagelados simbióticos alimentem seus corais hospedeiros

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Aug 07, 2023

Um candidato a transportador permitindo que dinoflagelados simbióticos alimentem seus corais hospedeiros

ISME Communications volume 3,

ISME Communications volume 3, Número do artigo: 7 (2023) Citar este artigo

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A parceria simbiótica entre corais e algas dinoflageladas é crucial para os recifes de corais. Os corais fornecem aos seus simbiontes de algas abrigo, dióxido de carbono e nitrogênio. Em troca, as algas simbióticas fornecem aos seus hospedeiros animais carbono fixo na forma de glicose. Mas como a glicose é transferida do simbionte de algas para o hospedeiro animal é desconhecido. Nós raciocinamos que um transportador residente na membrana da célula dinoflagelada facilitaria a transferência externa de glicose para o tecido animal hospedeiro circundante. Identificamos um candidato a transportador no dinoflagelado simbionte cnidário Breviolum minutum que pertence à família onipresente de uniportadores facilitadores de açúcar conhecidos como doces (açúcares eventualmente serão transportadores exportados). Análises anteriores de expressão gênica mostraram que BmSWEET1 é regulado positivamente quando as algas vivem simbioticamente em um hospedeiro cnidário em comparação com o estado de vida livre [1, 2]. Usamos microscopia de imunofluorescência para localizar BmSWEET1 na membrana da célula dinoflagelada. Ensaios de preferência de substrato em um sistema de transporte substituto de levedura mostraram que BmSWEET1 transporta glicose. A microscopia quantitativa mostrou que as células simbióticas de B. minutum têm significativamente mais proteína BmSWEET1 do que as células de vida livre da mesma cepa, consistente com a exportação durante a simbiose, mas não durante a fase planctônica de vida livre. Assim, BmSWEET1 está no lugar certo, na hora certa, e tem o substrato certo para ser o transportador com o qual as algas dinoflageladas simbióticas alimentam seus hospedeiros animais para alimentar os recifes de corais.

A simbiose é uma estratégia evolutiva poderosa que combina conjuntos de habilidades de espécies separadas para enfrentar os desafios de seleção ambiental como um consórcio. No caso dos recifes de coral, a parceria permite o crescimento abundante em águas pobres em nutrientes que, de outra forma, sustentariam muito pouca biomassa [3]. As simbioses com recifes de coral são notavelmente bem-sucedidas. Embora os recifes ocupem apenas 0,1% do ambiente marinho, eles suportam mais de 33% da diversidade marinha [4].

As algas simbióticas nos corais usam CO2 e energia luminosa para fabricar açúcares pela fotossíntese. O açúcar é alimentado ao coral, e esta 'transferência de moeda' simbiótica [5] sustenta a capacidade da maioria dos corais de depositar carbonato de cálcio e, assim, construir um recife [3]. Por sua vez, o hospedeiro de coral fornece aos seus simbiontes de algas abrigo, CO2 e nitrogênio precioso. A transferência de carbono fixado fotossinteticamente do simbionte para o hospedeiro foi demonstrada há mais de 60 anos por Muscatine e Hand [6], e os simbiontes fornecem até 90% da energia usada por um coral [3]. Trabalhos iniciais, que usaram simbiontes removidos do hospedeiro, indicaram que o glicerol era o principal produto de exportação [7]. No entanto, estudos recentes usando parcerias intactas mostram que a glicose é o principal produto de exportação e sugerem que a liberação de glicerol por simbiontes é um artefato induzido por isolá-los de seu hospedeiro [8,9,10] ou talvez transportado para o vacúolo do simbiossoma como um osmólito [ 11]. Assim, sabemos que forma de fotossintato é transferida e quanta transferência ocorre, mas não sabemos essencialmente nada sobre como ocorre a transferência.

O fotossintato transferido deve atravessar pelo menos duas membranas: a membrana celular da alga; e o chamado simbiossoma, uma membrana semelhante a um vacúolo criada durante a absorção fagocítica de um simbionte por um hospedeiro [12]. Dado que a glicose é impermeável à membrana, provavelmente existem transportadores em uma ou ambas as membranas para mover a glicose para fora. Nossa hipótese é que pelo menos um transportador estará na membrana da célula simbionte e será predominantemente ativo no hospital. Para identificar o(s) transportador(es), comparamos anteriormente a expressão gênica em células de vida livre e simbióticas de Breviolum minutum [1], um dinoflagelado simbionte de corais e anêmonas [13]. Vários transportadores mostraram expressão aumentada no hospite [1], e um - que chamamos de BmSWEET1 - é caracterizado aqui.

100 cells (n) and depicted as box/whisker plots. G Fluorescence intensity in the free-living cells. H Fluorescence intensity of the in hospite cells. I, J Background fluorescence intensity was quantified in equivalent numbers of cells prepared similarly but without the primary antiserum and is marginally less than was measured for free-living cells labelled with the primary antibody (compare G)./p>100 cells were quantified for each treatment (Fig. 4G–J). Baseline/background labelling was established by omitting the primary BmSWEET1 antiserum (Fig. 4I, J). Quantitation shows that the algae have significantly more BmSWEET1 protein in hospite (Fig. 4H) than they do whilst free-living (Fig. 4G). To control for differential accessibility of antibodies to the free-living cells versus the freshly isolated symbiotic cells, we measured cell wall thicknesses, which showed that the median wall thickness did not differ in the two groups (Fig. S2). The symbiotic dinoflagellates exist at lower light intensity (15 μmol m−2 s−1 photons) than their free living, in vitro cultured counterparts (60 μmol m−2 s−1 photons, see Materials & Methods). To control that light intensity was not affecting the amount of BmSWEET1 protein, we performed immunofluorescence on two cultures: one grown at 60 μmol m−2 s−1 photons, and another at 15 μmol m−2 s−1 photons. No significant difference in BmSWEET1 immunofluorescence labelling was observed at different light intensities in vitro (Fig. S3)./p>